Thèse Optimisation de l'Activité Fibrinolytique des Vésicules Extracellulaires par Ciblage des Récepteurs au Plasminogène H/F - Aix Marseille Université

Établissement : Aix Marseille Université
École doctorale : Recherches Biomédicales
Laboratoire de recherche : C2VN - Centre de Recherche en CardioVasculaire et Nutrition
Direction de la thèse : Françoise DIGNAT-GEORGE ORCID 0000000170064462
Début de la thèse : 2026-10-01
Date limite de candidature : 2026-04-26T23:59:59

Les thromboses microvasculaires disséminées constituent. une complication grave de nombreuses situations critiques, en particulier du sepsis sévère. En entraînant l'obstruction diffuse de la microcirculation, elle favorise l'ischémie tissulaire et la défaillance multiviscérale. Les traitements disponibles restent insatisfaisants : les anticoagulants ne dissolvent pas les thrombus constitués, tandis que les fibrinolytiques systémiques exposent à un risque hémorragique élevé.
Dans ce contexte, les vésicules extracellulaires (EVs) apparaissent comme une plateforme thérapeutique innovante. Naturellement sécrétées par les cellules, elles possèdent à leur surface des effecteurs de la fibrinolyse, notamment uPAR et plusieurs récepteurs au plasminogène, leur permettant de concentrer localement le système fibrinolytique, de générer de la plasmine et de favoriser une lyse ciblée de la fibrine. Des travaux antérieurs du laboratoire ont démontré que des EVs granulocytaires possèdent une activité fibrinolytique intrinsèque, améliorée après saturation en uPA.
Cependant, cette activité reste insuffisante pour une application thérapeutique, car elle décroît au cours du temps et atteint rapidement un plateau. Deux mécanismes principaux sont envisagés : un clivage progressif des récepteurs de surface après activation, ou une saturation fonctionnelle rapide empêchant la poursuite de la génération de plasmine. L'identification précise des récepteurs au plasminogène impliqués et la compréhension de leur contribution à cette perte d'activité constituent donc un verrou translationnel majeur.
Le projet de thèse vise ainsi à optimiser l'activité fibrinolytique des EVs par ciblage des récepteurs au plasminogène. Il reposera sur trois axes complémentaires. Le premier consistera en une cartographie des récepteurs au plasminogène exprimés à la surface d'EVs issues de différents types cellulaires, complétée par des tests fonctionnels afin d'identifier les récepteurs indispensables à l'activité lytique et de préciser leurs interactions avec uPAR. Le deuxième axe portera sur l'étude mécanistique de la perte d'activité fibrinolytique, en analysant l'évolution structurale et fonctionnelle des récepteurs sélectionnés, afin de distinguer un phénomène de clivage d'un phénomène de saturation. Le troisième axe visera à développer une stratégie de bioingénierie permettant de maintenir une activité lytique soutenue et reproductible, par régénération ou surexpression des récepteurs d'intérêt, puis à en valider l'efficacité dans des modèles expérimentaux adaptés, in vitro et in vivo.
Ce travail s'inscrit dans la continuité directe des recherches du laboratoire sur l'activité fibrinolytique des EVs et dans la dynamique translationnelle du brevet récemment déposé sur l'effet potentialisateur des EVs sur les thrombolytiques solubles. À terme, il ambitionne de faire émerger une stratégie de fibrinolyse ciblée capable de dissoudre les microthrombi sans altérer l'hémostase systémique, ouvrant de nouvelles perspectives thérapeutiques dans les coagulopathies microvasculaires sévères, en particulier du sepsis.

Les thromboses microvasculaires disséminées sont une complication grave du sepsis sévère et d'autres états critiques, responsable d'ischémie tissulaire diffuse et de défaillance multiviscérale. Les traitements actuels restent imparfaits : les anticoagulants n'agissent pas sur les thrombi constitués et les fibrinolytiques systémiques exposent à un risque hémorragique élevé. Dans ce contexte, les vésicules extracellulaires (EVs) représentent une plateforme innovante de thrombolyse ciblée, car elles expriment à leur surface uPAR et plusieurs récepteurs au plasminogène capables de concentrer localement le système fibrinolytique et de générer de la plasmine. Les travaux antérieurs du laboratoire ont démontré l'existence d'une activité fibrinolytique intrinsèque des EVs granulocytaires, mais aussi ses limites, avec une décroissance progressive et un effet plateau. La compréhension du rôle des récepteurs au plasminogène dans cette activité et l'optimisation de leur expression constituent donc un enjeu majeur pour développer de nouvelles approches thérapeutiques ciblant les thromboses microvasculaires sévères.

L'objectif général de cette thèse est d'optimiser l'activité fibrinolytique des vésicules extracellulaires (EVs) en ciblant leurs récepteurs au plasminogène, afin de développer une stratégie innovante de thrombolyse ciblée dans les thromboses microvasculaires sévères, notamment au cours du sepsis.

L'approche méthodologique combinera la production et la caractérisation d'EVs issues de différents types cellulaires, la cartographie de leurs récepteurs au plasminogène et l'évaluation fonctionnelle de leur activité fibrinolytique. Les mécanismes de perte d'activité seront étudiés au moyen de tests de génération de plasmine et de plusieurs modèles in vitro de thrombolyse, incluant des modèles de lyse de thrombus plasmatiques et de thrombi de sang total ainsi qu'une approche de lyse en système microfluidique en collaboration avec l'Université d'Aberdeen. Enfin, des stratégies de bioingénierie visant à renforcer durablement l'activité thrombolytique des EVs seront validées dans un modèle murin de choc septique par péritonite de type CLP, avec analyse histologique des microthrombi.

Le profil recherché est celui d'un candidat de Master 2 en biologie, biologie cellulaire ou biologie médicale, avec un fort intérêt pour l'hémostase, la thrombose, la fibrinolyse et la biologie des vésicules extracellulaires. Une expérience préalable en culture cellulaire, purification et caractérisation des EVs, cytométrie, ainsi qu'en tests fonctionnels de génération de plasmine ou de lyse de caillot constituera un atout. Le candidat devra également présenter de solides capacités d'organisation, de rigueur expérimentale, d'analyse critique des données, ainsi qu'une aptitude au travail en équipe.