Thèse Organoïdes de Canaux Efférents et d'Épididyme Humains pour la Contraception Masculine et l'Assistance Médicale à la Procréation AMP H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université de Montpellier
École doctorale : Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé
Laboratoire de recherche : DEFE - Développement Embryonnaire, Fertilité et Environnement
Direction de la thèse : Françoise PARIS
Début de la thèse : 2026-10-01
Date limite de candidature : 2026-05-11T23:59:59

La crise de la pilule conduit à interroger la place des hommes dans la charge contraceptive. À ce jour, la seule contraception masculine est une stérilisation, la vasectomie, les autres pistes de recherche ne passant pas les essais cliniques. Le tractus masculin de par sa biologie est un candidat sérieux pour une contraception. Formé des canaux efférents (CE) et de l'épididyme, il est critique quant au pouvoir fécondant des spermatozoïdes (spz). Ici, les CE ont une unique fonction dépendant de protéines spécifiques ce qui permet de penser que le développement d'un inhibiteur pharmacologique pourrait être assez aisé.
L'apparition de la procréation médicalement assistée (PMA) donna des solutions aux couples infertiles. Malgré les progrès, le taux de naissances reste faible. Bien que l'épididyme soit un organe crucial dans la maturation des spz, il reste oublié comme moyen pour améliorer la PMA. Or, une meilleure compréhension de sa biologie de l'épididyme pourrait d'une aide précieuse.
Notre compréhension des CE et de l'épididyme humains est issue de travaux sur l'animal. Il a été souligné que ces résultats animaux sont non-transposables chez l'humain car la reproduction est espèce-spécifique. Nous avons alors besoin de modèles humains et les organoïdes semblent ici prometteurs.
Nous avons développé plusieurs modèles d'organoïdes de tissus génitaux humains. Nous avons mis au point des organoïdes. de trompes de Fallope humaines (TFH). Les résultats ont été publiés en 2025, et montèrent que nous obtenions des organoïdes bine différenciés dans lesquels on peut cultivar des spz. Il est apparu que les organoïdes permirent de mieux maintenir la mobilité des spz que les milieux cliniques. Nous avons développé également des organoïdes de CE et d'épididyme humains. Les résultats obtenus avec ces deux segments génitaux ont fait l'objet d'un dépôt d'un brevet le 28 avril 2025 (INPI FR2504475). Une extension internationale est à ce jour en train d'être déposée par Inserm Transfert.
Nos organoïdes de CE humains montrent toutes les caractéristiques de différenciations avec la présence des types cellulaires recherchés. Les expériences fonctionnelles confirment qu'ils répondent bien à des molécules d'intérêt à visée contraceptive. Les organoïdes d'épididyme obtenus sont très différenciés avec une morphogenèse marquée. Nous retrouvons en outre des exosomes CD9 positifs dans les milieux.
L'objectif de ce travail de doctorat est de poursuivre les cultures d'organoïdes masculins en vue de : (1)- optimiser les protocoles pour une reproductibilité parfait des organoïdes entre lots ; (2)- réaliser les expériences fonctionnelles pour monter leur pertinence dans le développement de contraceptifs et de leur utilisation en AMP. La procédure expérimentale sera conduite de la manière suivante : D'abord, les organoïdes seront obtenus à partir de tissus humains issus de donneurs (autorisation n°PFS19-010). Ensuite, le travail est en deux parties qui seront réalisées en parallèle :
Organoïdes de CE humains : Nous finirons la caractérisation complète des organoïdes via les technologies de puces à ADN et/ou RNA seq, et de protéomique. Nous invaliderons ensuite, par CRISPR/Cas 9, des gènes codant pour des protéines d'intérêt dans la contraception et nous effectuerons les expériences fonctionnelles appropriées. Enfin, nous rechercherons des ligands pour les cibles identifiés lors des expériences d'invalidation géniques.
Organoïdes d'épididyme humain : Nous finirons la caractérisation complète des organoïdes via les technologies de puces à ADN et/ou RNA seq, et de protéomique. Simultanément, nous réaliserons une caractérisation des exosomes émis par les organoïdes : Nous rechercherons en particulier la présence des protéines DCXR, MIF, c-SRC, et PPIFA3, connues pour être incorporées dans le spz au cours de sa maturation épididymaire. Pour finir, nous réaliserons des cocultures spz humains-organoïdes et analyserons ensuite les paramètres des spz.

Ce travail de doctorat s'inscrit dans deux thématiques de l'équipe DEFE : (1)- Les fonctions de l'appareil génital masculin et (2)- la compétence des gamètes en PMA. Depuis 2021, l'équipe a mis au point des cultures d'organoïdes des appareils génitaux humains féminins et masculins. Les résultats sur les organoïdes féminins ont été publiés en janvier 2025 dans la revue Human Reproduction et montrent que nos organoïdes parviennent à maintenir une meilleure mobilité des spermatozoïdes humains comparativement à des milieux conventionnels utilisés aujourd'hui au cours des fécondations in vitro. Le protocole des organoïdes masculins ainsi que leurs utilisations en pharmacologie a fait l'objet d'une demande de brevet dont une extension internationale a été demandée. Ce travail de thèse poursuivra alors nos travaux sur les organoïdes masculins. Par ailleurs, l'équipe est très active sur la contraception masculine et grâce à ces modèles humains, espèrent identifier des cibles contraceptives dans les organoïdes : ce sera une partie du travail de doctorat.

Autonomie, rigueur et fiabilité. Passion pour la Science.
Expérience en culture cellulaire et en techniques de biologie moléculaire (qPCR, southern blot, western blot, etc.)
Expérience en microscopie confocale et immunofluorescence sera un plus.