Thèse Vectorisation Muqueuse d'Arnm H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université Claude Bernard Lyon 1 École doctorale : EDISS - Interdisciplinaire Sciences-Santé Laboratoire de recherche : LBTI - LABORATOIRE DE BIOLOGIE TISSULAIRE ET D'INGENIERIE THERAPEUTIQUE Direction de la thèse : Claire MONGE ORCID 0000000167152226 Début de la thèse : 2026-10-01 Date limite de candidature : 2026-06-03T23:59:59 Les thérapies et la vaccination à ARNm sont en pleine expansion due à la versatilité de la technologie quant à la production des vecteurs pour le transport des acides nucléiques mais aussi quant à la production des protéines cibles, ou antigéniques. La plupart des développements de vecteurs sont pensés pour l'injection. Cependant, la voie muqueuse offre une grande surface d'administration et des propriétés immunologiques uniques.
Dans ce contexte, l'objectif de ce projet de thèse est d'optimiser le transport et la prise en charge de l'ARNm dans le tissu muqueux par la fonctionnalisation de nanoparticules, pour prolonger leur temps de résidence à la muqueuse, surmonter la barrière du mucus et améliorer leur passage à travers l'épithélium et leur internalisation cellulaire. Des stratégies de mucoadhésion, de mucopénétration et de ciblage des cellules épithéliales seront comparées et sélectionnées dans différents modèles cellulaires muqueux. Deux types de nanoparticules seront étudiées : des particules lipidiques et des particules polysaccharidiques, produites par microfluidique.
Les stratégies de mucoadhésion envisagées incluent l'utilisation d'un polysaccharide mucoadhésif chargé positivement pour l'interaction avec les mucines du mucus chargées négativement ou de molécules de liaison aux glycoprotéines du mucus. La mucopénétration sera modulée par des tensioactifs et le ciblage des cellules épithéliales par la fonctionnalisation des particules par le greffage de ligands spécifiques des cellules épithéliales (anticorps et peptides). Ces greffages inclus une fonction innovante de rétention des particules dans l'espace intercellulaire pour développer une stratégie de slow release'. Un plan d'expérience sera établi pour évaluer les apports et bénéfices des différentes fonctionnalisation sur la prise en charge des particules, ainsi que les propriétés physico-chimiques intrinsèques des particules fonctionnalisées (DLS, ELS, BLI).
L'internalisation des particules et l'expression des ARNm sera quantifié dans différents modèles de cellules épithéliales muqueuses humaines : des cellules buccales, des cellules nasales et des cellules pulmonaires. L'internalisation sera suivie par microscopie et cytométrie de flux à l'aide de traceurs fluorescents, et l'expression de l'ARNm sera quantifiée grâce à des gènes rapporteurs (eGFP et luciférase).
Pour étudier l'efficacité in vitro des fonctionnalisations, plusieurs niveaux de cultures cellulaires seront utilisés. Tout d'abord les cultures 2D classiques, puis les culture ALI et enfin des organoïdes de muqueuses murines et humaines comme modèle le plus physiologique de récapitulation des fonctions et propriétés des muqueuses.
Les thérapies à ARNm ainsi que la vaccination à ARNm sont en pleine expansion due à la versatilité des technologies utilisant des vecteurs non viraux. L'administration des vecteurs LNP classiques se font principalement par injections et nécessitent des optimisations pour être efficaces par voie muqueuse. Ce projet a pour objectifs d'optimiser des nanovecteurs pour l'administration muqueuse d'ARNm et de développer des modèles de muqueuses 3D in vitro pour le suivi de leur efficacité. Développer des nanovecteurs optimisés pour l'administration d'ARNM par voie muqueuse

Les compétences techniques attendues sont du domaine de la formulation, de la chimie et de la biologie cellulaire.
Les compétences transversales recherchées sont la rigueur scientifique, le sens de l'organisation et du travail d'équipe.